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離心濃縮儀在脂質(zhì)代謝物中的應(yīng)用

更新時間:2024-11-26    點擊次數(shù):344

一、應(yīng)用背景

代謝組學是對生物體內(nèi)所有代謝物進行定性和定量分析,并研究代謝物與生理病理變化的關(guān)系的一門學科,在脂質(zhì)代謝物的研究中,血清樣本的預(yù)處理是一個關(guān)鍵步驟。脂質(zhì)代謝物通常存在于復雜的生物環(huán)境中,其濃度較低且易受干擾,因此需要對血清樣本進行精確的濃縮和純化,以提高后續(xù)檢測的靈敏度和準確性。


吉艾姆真空離心濃縮儀通過結(jié)合離心力、低溫蒸發(fā)和加熱蒸發(fā)等方法,能夠快速有效地去除樣本中的溶劑,實現(xiàn)樣本快速、高效濃縮。

二、實驗過程-脂質(zhì)代謝物樣品前處理

1、樣品采集與制備

(1)用2ml規(guī)格離心管用移液器取50ul血清樣本;

(2)加300ul甲醇(內(nèi)含標記物);

(3)加1ml二氯甲烷(提取脂質(zhì)代謝物);

(4)加300ul純水(與甲醇互溶)后渦旋混勻

(5)放入離心機,轉(zhuǎn)速14000rpm離心10分鐘,分層取下層清液800ul(液液萃取),放入1.5ml規(guī)格離心管

離心濃縮儀在脂質(zhì)代謝物中的應(yīng)用

2、樣品濃縮

離心濃縮儀在脂質(zhì)代謝物中的應(yīng)用

實驗使用吉艾姆冷凍型Auto R1-Plus離心濃縮儀

(1)啟動離心濃縮儀

(2)打開冷阱開關(guān),按start鍵冷阱預(yù)冷

(3)設(shè)置主機預(yù)冷

(4)冷阱預(yù)冷20分鐘后將樣品放入離心腔,設(shè)置溫度10℃,轉(zhuǎn)速1500rpm,蒸干

離心濃縮儀在脂質(zhì)代謝物中的應(yīng)用

3、復溶

濃縮后的樣品復溶至50ul

4、質(zhì)譜分析


三、濃縮效果

離心濃縮儀在脂質(zhì)代謝物中的應(yīng)用

四、實驗結(jié)論

在代謝組學研究中,選擇冷凍離心濃縮儀是較為理想的選擇。代謝組學聚焦生物體內(nèi)小分子代謝物分析,這些代謝物對溫度敏感。而冷凍離心濃縮儀的低溫環(huán)境可防止代謝物因高溫發(fā)生降解、變性或揮發(fā),確保樣品完整性。它能快速濃縮樣品,提高代謝物濃度,為后續(xù)檢測分析提供高質(zhì)量樣本,且高效的濃縮能力可提升實驗效率,能更好地滿足代謝組學研究對樣品處理的嚴格要求。


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